IKK激酶由IKKα、IKKβ和IKKγ三種亞基組成，該酶參與動物體內免疫細胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）患兒IKKB基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃，導致IKKβ上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機制，研究人員應用大引物PCR定點誘變技術培育出SCID模型小鼠，主要過程如圖1、2。
（1）在PCR反應體系中，需要加入引物和IKKB基因外，還需要加入 Taq酶（耐高溫DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸Taq酶（耐高溫DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸等。在圖1獲取突變基因過程中，需要以下3種引物：
引物A：5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'（下劃線字母為突變堿基）
引物B：5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'（下劃線部分為限制酶HindⅢ識別序列）
引物C：5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'（下劃線部分為限制酶SacⅠ識別序列）
則PCR1中使用的引物有 引物A和引物C引物A和引物C，PCR2中使用的引物有 引物B引物B和圖中大引物的 ②②（填“①”或“②”）鏈。
（2）圖2模型鼠培育過程中雜合模型鼠（F0）的培育涉及了一系列現(xiàn)代生物技術，如表是其中的一些步驟，請根據題意完成表格內容。
| 過程 | 實驗目的 | 步驟要點 |
| 導入 | a.處理突變基因與載體 | ① 利用限制酶（SacⅠ、HindⅢ）分別處理突變基因和載體 利用限制酶（SacⅠ、HindⅢ）分別處理突變基因和載體 |
| b.構建重組載體 | 利用DNA連接酶催化突變基因和載體連接 | |
| c.導入目的基因 | ② 利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵 利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵 |
|
| 發(fā)育 | d.獲取早期胚胎 | 利用專用培養(yǎng)液培養(yǎng)受精卵，并檢測其發(fā)育狀況 |
| e.代孕獲得小鼠 | 利用合適的早期胚胎進行胚胎移植 | |
| f.鑒定、篩選F0小鼠 | 利用PCR鑒定基因，篩選出雜合鼠F0 |
基因分離
基因分離
定律。研究人員對三種基因型小鼠胸腺淋巴細胞中組成IKK激酶的三種亞基進行提純和電泳，結果如圖3。請依據此結果提出SCID患者免疫缺陷產生的機制：IKKB基因突變導致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，T細胞減少
IKKB基因突變導致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，T細胞減少
。【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】Taq酶（耐高溫DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸；引物A和引物C；引物B；②；利用限制酶（SacⅠ、HindⅢ）分別處理突變基因和載體；利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵；基因分離；IKKB基因突變導致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，T細胞減少
【解答】
【點評】
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