利用酵母菌分解廢紙是一種環(huán)保的方式,但廢紙中的纖維素分子量大不能直接進(jìn)入酵母菌,且酵母菌無法分解利用環(huán)境中的纖維素。為解決這一難題,科學(xué)家將纖維素酶基因通過重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌。其所用質(zhì)粒及其酶切位點(diǎn)如下圖1,外源DNA 上的纖維素酶基因及其酶切位點(diǎn)如圖2。請回答下列問題:
(1)圖1、圖2中的質(zhì)粒和纖維素酶基因分別作為重組DNA技術(shù)中的 運(yùn)載體和目的基因運(yùn)載體和目的基因,為防止目的基因自身環(huán)化,圖中可選用的最合適的限制酶是 HindⅢ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ。
(2)若質(zhì)粒被 HindⅢ限制酶識別的序列是-AAGCTT-,并在 A 與A 之間切割。請畫出被切割后所形成的黏性末端。
(3)科學(xué)家進(jìn)一步構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒,進(jìn)行了一系列的研究。圖3是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)輸?shù)氖疽鈭D。
①圖3中已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的菌株有 菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
②將4株菌株分別置于以 纖維素纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上,其中菌株I、II不能存活,請解釋菌株II不能存活的原因。 菌株Ⅱ雖能合成纖維素分解酶,但是不能將酶釋放到細(xì)胞外起作用,而纖維素也不能進(jìn)入細(xì)胞菌株Ⅱ雖能合成纖維素分解酶,但是不能將酶釋放到細(xì)胞外起作用,而纖維素也不能進(jìn)入細(xì)胞。
③在利用纖維素生產(chǎn)酒精時(shí),菌株Ⅳ更具有優(yōu)勢,原因是 使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法).
【答案】運(yùn)載體和目的基因;HindⅢ和PstⅠ;菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;纖維素;菌株Ⅱ雖能合成纖維素分解酶,但是不能將酶釋放到細(xì)胞外起作用,而纖維素也不能進(jìn)入細(xì)胞;使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面
【解答】
【點(diǎn)評】
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