PCR技術(shù)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來(lái)的新技術(shù),廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、基因工程及其他與DNA鑒定相關(guān)的領(lǐng)域,如疾病檢測(cè)、商品檢疫、法醫(yī)鑒定等。回答下列問(wèn)題;
(1)引物是PCR技術(shù)中的關(guān)鍵物質(zhì)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增某個(gè)致病基因時(shí),所設(shè)計(jì)的一對(duì)引的特點(diǎn)。引物必須具備兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對(duì)兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對(duì)和兩種引物間不能互補(bǔ)配對(duì)兩種引物間不能互補(bǔ)配對(duì)的特點(diǎn)。
(2)將PCR所需的物質(zhì)準(zhǔn)備完畢后,在PCR儀上用94~96℃的溫度預(yù)熱5min,其目的是利用高溫使DNA變性形成單鏈片段利用高溫使DNA變性形成單鏈片段。溫度降低到50~60℃后,發(fā)生引物與模板鏈的結(jié)合引物與模板鏈的結(jié)合,將溫度回升至72℃,反應(yīng)體系中的熱穩(wěn)定DNA聚合熱穩(wěn)定DNA聚合酶催化dNTPdNTP合成雙鏈DNA。
(3)多重PCR技術(shù)在一個(gè)反應(yīng)體系中使用兩對(duì)以上的引物,可應(yīng)用于檢測(cè)食品中的多種致病菌,原因是待測(cè)樣品存在多種致病菌,每對(duì)引物用于擴(kuò)增某種致病菌的特異性基因,多對(duì)引物可同時(shí)擴(kuò)增出多種目的基因待測(cè)樣品存在多種致病菌,每對(duì)引物用于擴(kuò)增某種致病菌的特異性基因,多對(duì)引物可同時(shí)擴(kuò)增出多種目的基因。
【考點(diǎn)】目的基因的篩選與獲取.
【答案】兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對(duì);兩種引物間不能互補(bǔ)配對(duì);利用高溫使DNA變性形成單鏈片段;引物與模板鏈的結(jié)合;熱穩(wěn)定DNA聚合;dNTP;待測(cè)樣品存在多種致病菌,每對(duì)引物用于擴(kuò)增某種致病菌的特異性基因,多對(duì)引物可同時(shí)擴(kuò)增出多種目的基因
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:2難度:0.7
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1.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)通過(guò)PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長(zhǎng)度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTPA.①③ B.①④ C.②③ D.②④ 發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:28引用:1難度:0.6 -
2.通過(guò)設(shè)計(jì)引物,運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過(guò)程,其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對(duì),但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì),反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、Taq酶等 B.第2輪PCR,引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因 C.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入運(yùn)載體 D.第3輪PCR結(jié)束后,含突變堿基對(duì)且兩條鏈等長(zhǎng)的DNA占 12發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:121引用:5難度:0.7 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.方法①需要限制酶和DNA連接酶 B.方法②需要解旋酶和DNA聚合酶 C.方法③需要對(duì)探針進(jìn)行特殊標(biāo)記 D.方法①②③都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:25引用:2難度:0.6
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