徑柳匙葉草是一種泌鹽植物?？蒲泄ぷ髡邔搅兹~草的TaNHX2基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，圖中箭頭所指為Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制酶的切點(diǎn)；圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖；圖3是農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，請(qǐng)分析回答問題：
（1）基因工程的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建。
（2）將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從 基因文庫基因文庫獲取目的基因。此外也可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增TaNHX2基因，需要加入的酶是 Taq酶Taq酶，反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，55～60℃有利于 引物引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。
（3）若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ切割圖3所示質(zhì)粒，該方案的缺陷是 目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）（答出一點(diǎn)即可）。
（4）目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄出了mRNA，常用 分子雜交分子雜交的方法進(jìn)行檢測，為了檢測技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于 個(gè)體個(gè)體水平的檢測。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建；基因文庫；Taq酶；引物；Sau3AⅠ；目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化（或目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定）；分子雜交；個(gè)體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/9 8:0:9組卷：1引用：1難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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