研究人員將抗鹽基因轉(zhuǎn)入普通煙草培育出抗鹽煙草,該過程所用的質(zhì)粒與含抗鹽基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示.限制性核酸內(nèi)切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT.圖3表示該過程中利用含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化作用的示意圖.請回答下列問題.
(1)圖1質(zhì)粒中沒有標(biāo)注出來的基本結(jié)構(gòu)是 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn).
(2)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選用限制酶 HindⅢ和Sau3AIHindⅢ和Sau3AI切割質(zhì)粒,選用 HindⅢ和Sau3AI或HindⅢ和BamHIHindⅢ和Sau3AI或HindⅢ和BamHI限制酶切割含目的基因的DNA片段.限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的 磷酸二酯磷酸二酯鍵.
(3)將上述切開的質(zhì)粒與目的基因混合,加入DNA連接酶連接后,導(dǎo)入受體受體細(xì)胞,受體細(xì)胞的類型(對兩種抗生素表現(xiàn)出抗性R或敏感性S)包含 ①②④①②④(不考慮基因突變).
①XR、YR ②XR、YS ③XS、YR ④XS、YS
(4)圖3過程 ①①(填序號)中發(fā)生了基因重組,過程②、③所用的培養(yǎng)基中,通常要調(diào)控好 生長素和細(xì)胞分裂素生長素和細(xì)胞分裂素兩類激素的比例.
(5)從個(gè)體水平鑒定抗鹽轉(zhuǎn)基因煙草是否培育成功的方法是 用一定濃度鹽水澆灌轉(zhuǎn)基因幼苗或?qū)⑵湟圃缘禁}堿地中觀察其生長狀態(tài)用一定濃度鹽水澆灌轉(zhuǎn)基因幼苗或?qū)⑵湟圃缘禁}堿地中觀察其生長狀態(tài).
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】復(fù)制原點(diǎn);HindⅢ和Sau3AI;HindⅢ和Sau3AI或HindⅢ和BamHI;磷酸二酯;①②④;①;生長素和細(xì)胞分裂素;用一定濃度鹽水澆灌轉(zhuǎn)基因幼苗或?qū)⑵湟圃缘禁}堿地中觀察其生長狀態(tài)
【解答】
【點(diǎn)評】
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