我國科學(xué)家將抗蟲基因A、抗凍基因B導(dǎo)入番茄，獲得了抗蟲、耐寒的轉(zhuǎn)基因番茄。所選用的抗蟲基因A、抗凍基因B及質(zhì)粒的限制酶切割位點(diǎn)如圖所示。
（1）將抗蟲基因A和質(zhì)粒連接的過程需要用到的酶有 Nde I、Xba INde I、Xba I（填圖中限制酶）和DNA連接酶。將抗蟲基因A與質(zhì)粒連接后，再將抗凍基因B連接到重組質(zhì)粒上所用的限制酶是 BamH IBamH I。酶切后對得到的片段用去磷酸化酶處理，使末端游離的磷酸基團(tuán)脫離，目的是 防止酶切片段的自身連接（或相互連接）防止酶切片段的自身連接（或相互連接）。
（2）多重PCR技術(shù)是在一個(gè)PCR反應(yīng)體系中加入多對引物，針對多個(gè)DNA模板或同一DNA模板的不同區(qū)域，擴(kuò)增多個(gè)目的基因的PCR技術(shù)。利用多重PCR技術(shù)確定轉(zhuǎn)基因番茄中是否含有A、B兩種基因時(shí)，體系中應(yīng)加入 44種引物。所加引物的設(shè)計(jì)依據(jù)是 已知目的基因的一段核苷酸序列已知目的基因的一段核苷酸序列，對所加引物的要求是 不同引物的核苷酸序列不同、任意兩引物間不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對、引物自身不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對不同引物的核苷酸序列不同、任意兩引物間不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對、引物自身不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對（寫出兩點(diǎn)）。
【答案】Nde I、Xba I；BamH I；防止酶切片段的自身連接（或相互連接）；4；已知目的基因的一段核苷酸序列；不同引物的核苷酸序列不同、任意兩引物間不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對、引物自身不會(huì)發(fā)生堿基互補(bǔ)配對
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：1難度：0.6
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1．通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是（ ?。?/h2>發(fā)布：2024/11/19 10:30:1組卷：117引用：5難度：0.7 -
2．雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等，還需加入的原料是（ ?。?br />
①dCTP，dGTP，dATP
②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：27引用：1難度：0.6 -
3．目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列，一般基于兩種不同的方法，即DNA克隆和DNA分子雜交，如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?/h2>發(fā)布：2024/11/22 4:0:1組卷：22引用：2難度：0.6