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新冠病毒S蛋白與其侵染宿主細胞密切相關(guān),疫苗的研究與生產(chǎn)有多種途徑,回答以下問題。
(1)我國目前已上市的滅活新冠疫苗,是利用Vero細胞(非洲綠猴的腎臟上皮細胞)對病毒進行增殖后滅活,因此需對Vero細胞進行大量培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)時需利用胰蛋白酶使細胞分散開并制成
細胞懸浮液
細胞懸浮液
。對病毒非滅活是指利用物理或化學(xué)手段使病原體失去感染能力,但保留原來的
抗原
抗原
結(jié)構(gòu)。
(2)S蛋白的RBD多肽區(qū)域是新冠病毒感染宿主細胞的關(guān)鍵。研究人員現(xiàn)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)S蛋白的RBD多肽片段制作重組蛋白疫苗?;具^程如圖所示:

(注:LacZ基因可使細菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色。若無該基因或該基因被破壞,則菌落成白色。)
①提取新冠病毒RNA經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
得到的cDNA,經(jīng)
PCR
PCR
技術(shù)擴增得到RBD基因,與克隆質(zhì)粒pUC質(zhì)粒連接,并接種到添加
氨芐青霉素和X-gal
氨芐青霉素和X-gal
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時間后,挑選顏色為
白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng),提取重組質(zhì)粒pUC-RBD。
②接下來應(yīng)用限制酶對pUC-RBD進行酶切獲得RBD基因,并與BamHI酶和XhoI酶切后的載體pET質(zhì)粒連接。但RBD基因序列兩端無相應(yīng)限制酶酶切位點,現(xiàn)欲利用RCR技術(shù)對RBD基因進行擴增同時在其上下游區(qū)域增補上相應(yīng)限制酶的識別序列,則根據(jù)如表,PCR時所用的上下游引物應(yīng)分別添加的序列是
5’-GGATCC-3’和5’CTCGAG-3’
5’-GGATCC-3’和5’CTCGAG-3’
。
限制酶 BamHⅠ HindⅢ XhoⅠ XbaⅠ
識別序列 5′-GGATCC-3′ 5′-AAGCTT-3′ 5′-CTCGAG-3′ 5′-TCTAGA-3′
③構(gòu)建好的基因表達載體再次導(dǎo)入大腸桿菌培養(yǎng),要檢測最終是否表達了S蛋白的RBD區(qū)域,可以加入
RBD抗體
RBD抗體
進行檢測。
(3)有研究表明,現(xiàn)有的疫苗對新出現(xiàn)的變異類型病毒仍具有預(yù)防效果,原因是
與原有新冠病毒的抗原結(jié)構(gòu)相似
與原有新冠病毒的抗原結(jié)構(gòu)相似
。

【答案】細胞懸浮液;抗原;逆轉(zhuǎn)錄;PCR;氨芐青霉素和X-gal;白色;5’-GGATCC-3’和5’CTCGAG-3’;RBD抗體;與原有新冠病毒的抗原結(jié)構(gòu)相似
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:32引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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