玉米具有一定抗鹽堿能力和抗低溫能力，這與其抗逆性基因M有關(guān)。為研究基因M轉(zhuǎn)入水稻后在逆境脅迫應(yīng)答中的重要作用，科學(xué)家做了如下實驗：首先將基因M和綠色熒光蛋白基因重組得到目的基因，該基因的兩端同時擁有HindⅢ和BamHⅠ切點，隨后將目的基因?qū)胨静y定了基因M在水稻中的表達(dá)水平。
（1）當(dāng)用圖1所示質(zhì)粒與目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時，最合適的限制酶是 BamHIBamHI。
（2）根據(jù)圖2，宜選擇玉米的 葉葉（填器官名稱）提取mRNA，然后在體外通過 逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）的方式獲得玉米抗逆性基因M，再用 PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增，該技術(shù)的簡要步驟是 變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸。
（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入水稻幼胚，加入含有 潮霉素潮霉素的培養(yǎng)基篩選，提取培養(yǎng)后的水稻幼胚DNA，設(shè)計引物對目的基因進(jìn)行電泳鑒定，通過圖3結(jié)果可知1、6、7、9、10、111、6、7、9、10、11號水稻材料已成功插入目的基因。研究人員又用顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞，發(fā)出綠色熒光的相應(yīng)植株為目的植株，依據(jù)圖4結(jié)果，后續(xù)還需進(jìn)行的實驗步驟為 將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續(xù)培養(yǎng)，篩選出耐鹽效果最佳的植株將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續(xù)培養(yǎng)，篩選出耐鹽效果最佳的植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHI；葉；逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）；PCR；變性、復(fù)性、延伸；潮霉素；1、6、7、9、10、11；將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續(xù)培養(yǎng)，篩選出耐鹽效果最佳的植株
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：8引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6