如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如圖（以EcoRⅠ酶切為例）：
請據(jù)圖回答問題：
（1）步驟Ⅰ用的EcoRⅠ主要存在于 原核原核生物中，限制酶存在于該類生物中的主要作用是 切割外源DNA，保證自身安全切割外源DNA，保證自身安全。
（2）步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵；PCR每次循環(huán)一般可分為 變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸（按順序書寫）三步，其中第二步的目的是 引物與兩條模板DNA單鏈結(jié)合引物與兩條模板DNA單鏈結(jié)合。
（3）若如表所列為已知的DNA序列和設(shè)計的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是 ③④③④（從引物①②③④中選擇，填編號）。
| DNA 序列（虛線處省略了部分核苷酸序列） | |
|
已知序列 |
|
|
PCR 引物 |
①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ③5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
D
D
。A．5′-AACTATGCG----------AGCCCTT-3′
B．5′-TTGATACGC----------CGAGTAC-3′
C．5′-GCAATGCGT----------TCGGGAA-3′
D．5′-AATTCCATG----------CTGAATT-3′
【考點】目的基因的篩選與獲取．
【答案】原核；切割外源DNA，保證自身安全；磷酸二酯鍵；變性、復(fù)性、延伸；引物與兩條模板DNA單鏈結(jié)合；③④；D
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：38引用：1難度：0.6
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①dCTP，dGTP，dATP
②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：27引用：1難度：0.6 -
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