圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列.現(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4種限制性核酸內(nèi)切它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.
(1)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段,其產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為537、790、661537、790、661.
若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞.從隱性純合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有44種不同長(zhǎng)度的DNA片段.
(2)為了提高試驗(yàn)成功率,需要通過(guò)PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,以獲得目的基因的大量拷貝.該方法也是檢測(cè)遺傳遺傳多樣性的最簡(jiǎn)單方法.
(3)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是BamHⅠBamHⅠ.
(4)在選出的大腸桿菌內(nèi)基因D能成功表達(dá)的原因是生物共用一套遺傳密碼子生物共用一套遺傳密碼子.其表達(dá)產(chǎn)物是一條多肽鏈,如考慮終止密碼,則其至少含有的氧原子數(shù)為341341.
(5)為了篩選出成功導(dǎo)入含目的基因D的重組質(zhì)粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在含抗生素B抗生素B的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖3的菌落. 再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含另一種抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖4的結(jié)果(空圈表示與圖3對(duì)照無(wú)菌落的位置).請(qǐng)?jiān)趫D3中圈出一個(gè)含目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落.
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【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】537、790、661;4;PCR;遺傳;BamHⅠ;生物共用一套遺傳密碼子;341;抗生素B;
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:1難度:0.1
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