試卷征集
加入會員
操作視頻

美西螈具有很強(qiáng)再生能力。研究表明,美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制,科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體,具體方法如下、回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(一)基因工程抗原的制備
(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列,合成引物,利用PCR擴(kuò)增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3-OH與加入的脫氧核苷酸的5-P形成磷酸二酯鍵,則新合成鏈的延伸方向是
5'→3'
5'→3'
(填“5'→3'”或“3'→5'”)。
(2)載體和CD14片段的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoⅠ和SalⅠ分別酶切CD14和載體后連接,CD14接入載體時會形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA。
可以
可以
(可以/不能)用這兩種限制酶對CD14的連接方向進(jìn)行鑒定,理由是
若是正向連接,XhoⅠ和SalⅠ能分別識別各自的特異性序列,并將CD14切下。若是反向連接,重組DNA沒有XhoⅠ和SalⅠ能識別的特異性序列
若是正向連接,XhoⅠ和SalⅠ能分別識別各自的特異性序列,并將CD14切下。若是反向連接,重組DNA沒有XhoⅠ和SalⅠ能識別的特異性序列

培養(yǎng)能表達(dá)CD14蛋白的大腸桿菌,分離純化目的蛋白。
(二)抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示:
(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射
CD14蛋白
CD14蛋白
能產(chǎn)生CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞
能產(chǎn)生CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞
。
(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長特點(diǎn)是
能無限增殖
能無限增殖

(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中,根據(jù)抗原一抗體雜交原理,需加入
標(biāo)記的CD14蛋白
標(biāo)記的CD14蛋白
進(jìn)行專一抗體檢測,檢測過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體,原因是
形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多,有的不能分泌抗CD14抗體
形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多,有的不能分泌抗CD14抗體

(6)步驟⑥從
小鼠腹水
小鼠腹水
中提取到大量的抗CD14抗體,用于檢測巨噬細(xì)胞。

【答案】5'→3';可以;若是正向連接,XhoⅠ和SalⅠ能分別識別各自的特異性序列,并將CD14切下。若是反向連接,重組DNA沒有XhoⅠ和SalⅠ能識別的特異性序列;CD14蛋白;能產(chǎn)生CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞;能無限增殖;標(biāo)記的CD14蛋白;形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多,有的不能分泌抗CD14抗體;小鼠腹水
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/30 9:0:8組卷:17引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.為實(shí)現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
    (1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
     
    區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
    (2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
     
    細(xì)胞,誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合,利用
     
    篩選得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測,多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
    (3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
     
    。
    (4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6
  • 2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
  • 3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司| 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:5.0.7 |隱私協(xié)議|第三方SDK|用戶服務(wù)條款
本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正