現(xiàn)有重組質(zhì)粒甲（共含2686個堿基對，不含T-DNA）和乙，為避免基因反接，研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質(zhì)粒甲、乙，再利用所得片段構(gòu)建了重組質(zhì)粒丙（如圖所示），然后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞。培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請回答：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是將VP1基因插入到T-DNAT-DNA中，從而使VP1基因進(jìn)入植物細(xì)胞后，能整合到染色體的DNA上。利用重組質(zhì)粒甲、乙構(gòu)建丙的過程中，用到的工具酶是限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶。
（2）將重組質(zhì)粒甲、乙和丙進(jìn)行分組，每組只含其中一種重組質(zhì)粒，同時用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割，結(jié)果如表所示：
| 組別 | 切割后所得DNA片段的情況 |
| 第1組 | 只得到含有2146和540個堿基對的2種DNA片段 |
| 第2組 | 只得到含有540和12400個堿基對的2種DNA片段 |
| 第3組 | 只得到含有12400和1000個堿基對的2種DNA片段 |
0
0
個游離的磷酸基團(tuán)，限制酶Ⅰ在重組質(zhì)粒甲中有1
1
個切割位點(diǎn)，表中第2
2
組是切割重組質(zhì)粒丙的結(jié)果。（3）在植物組織培養(yǎng)過程中需要無菌操作，因此對外植體（離體的組織塊）要進(jìn)行
消毒
消毒
處理。用于培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基不適用于培養(yǎng)胚狀體，原因是培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】T-DNA；限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶；0；1；2；消毒；培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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