H18雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的凋亡現(xiàn)象制約著生產(chǎn)能力的提高.通過基因工程可改造H18雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力,相關(guān)步驟如下:
①細(xì)胞培養(yǎng):將人肝癌細(xì)胞在含10%小牛血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng).一段時(shí)間后,用胰蛋白酶處理培養(yǎng)液,漂洗后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1×107個(gè)?mL-1.
②免疫小鼠:向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾臟制成細(xì)胞懸液備用.
③細(xì)胞融合及篩選:將脾臟細(xì)胞懸液和骨髓瘤細(xì)胞懸液在50%PEG作用下進(jìn)行融合,篩選出能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的H18雜交瘤細(xì)胞.
④改造H18雜交瘤細(xì)胞:利用PCR技術(shù)獲得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),構(gòu)建表達(dá)載體,通過脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞,再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞.
請(qǐng)分析回答:
(1)步驟①肝癌細(xì)胞合成培養(yǎng)液中特有的成分是血清(血清、血漿)血清(血清、血漿),培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素的目的是防止雜菌污染防止雜菌污染.
(2)步驟②中,肝癌細(xì)胞免疫小鼠需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次,其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞.
(3)步驟③中,除了用50%PEG促進(jìn)細(xì)胞融合外,常用的生物誘導(dǎo)因素是滅活的病毒滅活的病毒,物理誘導(dǎo)方法有電刺激(振蕩或離心)電刺激(振蕩或離心)(寫出一種即可).步驟④中通過脂質(zhì)體法能將表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞依賴的原理是膜的流動(dòng)性膜的流動(dòng)性.
(4)與普通抗肝癌藥物相比,用抗人肝癌單克隆抗體HAb18與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點(diǎn)是能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量.
(5)乙醇有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用.為了建立H18雜交瘤細(xì)胞凋亡檢測(cè)模型,科研人員利用不同濃度的乙醇溶液誘導(dǎo)H18雜交瘤細(xì)胞凋亡,其結(jié)果如圖所示.抗凋亡細(xì)胞株的建立與篩選應(yīng)選擇的誘導(dǎo)條件是CC(用圖中字母表示).
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】血清(血清、血漿);防止雜菌污染;刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞;滅活的病毒;電刺激(振蕩或離心);膜的流動(dòng)性;能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量;C
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:3難度:0.3
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5 -
3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
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