新冠病毒(RNA病毒)表面的S刺突蛋白上的受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(S-RBD)能夠與人細(xì)胞表面受體ACE2結(jié)合,介導(dǎo)病毒入侵宿主細(xì)胞。科研人員進(jìn)行了抗S-RBD蛋白單克隆抗體的制備及研究。
(1)從新冠患者體內(nèi)提取到S蛋白的RBD片段,多次注射到小鼠體內(nèi),目的是 刺激小鼠產(chǎn)生更多已免疫的B細(xì)胞(漿細(xì)胞)刺激小鼠產(chǎn)生更多已免疫的B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。一段時(shí)間后將獲取脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合,利用 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。
(2)將得到的4種雜交瘤細(xì)胞分別進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),分別取其上清液進(jìn)行抗體陽性檢測(cè),從中選出產(chǎn)生“最優(yōu)抗體”的雜交瘤細(xì)胞。檢測(cè)的流程如圖1,檢測(cè)的結(jié)果如圖2。
圖1實(shí)驗(yàn)過程中,將S-RBD固定,將上述4種雜交瘤細(xì)胞的上清液和未免疫小鼠的血清加入到反應(yīng)體系,然后加入酶標(biāo)抗體。由圖可知酶標(biāo)抗體與待測(cè)抗體結(jié)合,將待測(cè)抗體作為 抗原抗原,酶標(biāo)抗體攜帶的酶再使底物顯色,底物顯色越深吸光值越大。據(jù)圖2結(jié)果分析,研究人員認(rèn)為雜交瘤細(xì)胞 ①①(填“序號(hào)”)產(chǎn)生的抗體為“最優(yōu)抗體”,依據(jù)是 不同稀釋倍數(shù)下,①的吸光值最大,說明酶標(biāo)抗體與①產(chǎn)生的抗體結(jié)合最多,①產(chǎn)生的抗體與抗原結(jié)合能力最強(qiáng)不同稀釋倍數(shù)下,①的吸光值最大,說明酶標(biāo)抗體與①產(chǎn)生的抗體結(jié)合最多,①產(chǎn)生的抗體與抗原結(jié)合能力最強(qiáng)。
(3)研究人員將選出的“最優(yōu)抗體”用于制備成新冠病毒抗原檢測(cè)試劑盒,利用該試劑盒可以快速初篩是否感染新冠病毒,反映出單克隆抗體最廣泛的用途是 作為體外診斷試劑作為體外診斷試劑。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】刺激小鼠產(chǎn)生更多已免疫的B細(xì)胞(漿細(xì)胞);選擇培養(yǎng)基;抗原;①;不同稀釋倍數(shù)下,①的吸光值最大,說明酶標(biāo)抗體與①產(chǎn)生的抗體結(jié)合最多,①產(chǎn)生的抗體與抗原結(jié)合能力最強(qiáng);作為體外診斷試劑
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:1難度:0.7
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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