2019年底，新冠肺炎在我國(guó)大面積流行。病原體為一種新型RNA冠狀病毒，即2019-nCoV?？蒲腥藛T以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原，擬利用基因工程研制新冠病毒重組蛋白疫苗用于接種預(yù)防。圖1表示病毒S蛋白的基因，圖2表示取自真菌細(xì)胞的質(zhì)粒PcMV及其上部分限制酶切位點(diǎn)，圖3表示疫苗制作的簡(jiǎn)要操作流程。
（1）圖3中步驟①所需要的酶和原料是 逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸。步驟②需要的酶是限制酶和 DNA連接酶DNA連接酶。
（2）圖1中不能選擇EcoRI和AccI兩種限制酶切割S蛋白基因，原因是 這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性?，F(xiàn)在科研人員已經(jīng)可以根據(jù)需要在目的基因兩端添加需要的限制酶切割位點(diǎn)序列，但是一般不在目的基因的兩端添加同一種酶切位點(diǎn)，原因是 防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上。若選擇兩種酶且位點(diǎn)序列添加在S蛋白基因的左右兩端（考慮轉(zhuǎn)錄的方向）應(yīng)分別選擇 ApaⅠ和SolⅠApaⅠ和SolⅠ。
（3）PcMV質(zhì)粒上氨芐青霉素抗性基因的作用是 篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。
（4）將表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)的原因是 PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)。為了檢驗(yàn)表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶和四種脫氧核苷酸；DNA連接酶；這兩種酶在S蛋白基因上有切割位點(diǎn)會(huì)破壞S蛋白基因的完整性；防止目的基因（S蛋白基因）自身連接或反向連接在質(zhì)粒上；ApaⅠ和SolⅠ；篩選和檢測(cè)表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；PcMV質(zhì)粒取自真菌，屬真核細(xì)胞，導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中易于基因的表達(dá)；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.6
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