【加試題】某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答：
（1）原生質(zhì)體的分離：在無(wú)菌條件下，取煙草無(wú)菌苗的葉片，放入含有0.5mol/L甘露醇（維持較高滲透壓）的

纖維素酶和果膠酶

纖維素酶和果膠酶

混合液處理，經(jīng)過(guò)離心純化后獲得原生質(zhì)體。
（2）原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該

降低

降低

培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、

心形胚

心形胚

和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過(guò)生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是

細(xì)胞分裂素

細(xì)胞分裂素

，胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是：

D

D

。
（A．液泡小、細(xì)胞核小  B．液泡大，細(xì)胞核大  C．液泡大，細(xì)胞核小  D．液泡小、細(xì)胞核大）
（3）為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離的到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過(guò)

原生質(zhì)體融合

原生質(zhì)體融合

方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用

PCR

PCR

擴(kuò)增相關(guān)基因，來(lái)鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。