蛋白質(zhì)NLP是擬南芥細(xì)胞內(nèi)的硝酸鹽受體,與硝酸鹽結(jié)合后會(huì)激活硝酸鹽響應(yīng)基因的啟動(dòng)子??蒲腥藛T通過構(gòu)建多種轉(zhuǎn)基因擬南芥研究NLP的功能,在NLP研究中利用硝酸鹽響應(yīng)基因的啟動(dòng)子與熒光素酶基因組成報(bào)告基因。
(1)報(bào)告基因中添加熒光素酶基因的優(yōu)點(diǎn)是 熒光素酶基因表達(dá)產(chǎn)物可催化熒光素氧化發(fā)出熒光,易于檢測(cè)熒光素酶基因表達(dá)產(chǎn)物可催化熒光素氧化發(fā)出熒光,易于檢測(cè)。報(bào)告基因的受體擬南芥須為NLP合成突變型,以避免 細(xì)胞內(nèi)NLP細(xì)胞內(nèi)NLP對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。
(2)為獲得NLP的氨基端和羧基端以分別研究其功能,科研人員構(gòu)建了包含NLP片段的重組基因,如圖1所示,其中需要人為添加起始密碼子編碼序列的是 編碼羧基端的NLP基因片段編碼羧基端的NLP基因片段。若通過引物同時(shí)為NLP基因片段添加限制酶識(shí)別序列和起始密碼子編碼序列,起始密碼子編碼序列需添加在限制酶識(shí)別序列的 3'端3'端(填“3′端”或“5′端”或“3′端、5′端均可以”)。
(3)利用報(bào)告基因與上述三種重組NLP基因分別制備轉(zhuǎn)基因擬南芥,并編號(hào)為1組、2組、3組,與對(duì)照組分別置于含KCl或KNO3的培養(yǎng)基中培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。對(duì)照組擬南芥的實(shí)驗(yàn)處理是 導(dǎo)入報(bào)告基因,不導(dǎo)入重組NLP基因導(dǎo)入報(bào)告基因,不導(dǎo)入重組NLP基因。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知激活硝酸鹽響應(yīng)基因表達(dá)的是 羧基端羧基端(填“氨基端”或“羧基端”或“氨基端、羧基端均可以”);硝酸鹽存在時(shí),NLP激活硝酸鹽響應(yīng)基因表達(dá)的機(jī)制是 NLP的氨基端會(huì)抑制羧基端的激活作用,硝酸鹽能夠解除抑制作用NLP的氨基端會(huì)抑制羧基端的激活作用,硝酸鹽能夠解除抑制作用。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用.
【答案】熒光素酶基因表達(dá)產(chǎn)物可催化熒光素氧化發(fā)出熒光,易于檢測(cè);細(xì)胞內(nèi)NLP;編碼羧基端的NLP基因片段;3'端;導(dǎo)入報(bào)告基因,不導(dǎo)入重組NLP基因;羧基端;NLP的氨基端會(huì)抑制羧基端的激活作用,硝酸鹽能夠解除抑制作用
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:1難度:0.6
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