基因工程的相關(guān)技術(shù)可用于病毒檢測，也可用于制備疫苗。利用熒光PCR技術(shù)檢測是否感染某種RNA病毒時，基本操作流程為：提取病毒的RNA→熒光PCR擴(kuò)增反轉(zhuǎn)錄DNA→熒光檢測。請回答下列問題：
（1）分離病毒的RNA通常在冰浴條件下進(jìn)行，目的是抑制RNA酶RNA酶的活性，防止病毒的RNA降解。熒光PCR反應(yīng)體系中需要加入的酶和原料是反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸。為保證反應(yīng)體系只擴(kuò)增病毒特異性核酸序列，應(yīng)先根據(jù)病毒的特異性核酸序列設(shè)計(jì)2種引物2種引物。
（2）熒光染料能摻入DNA雙鏈中發(fā)出熒光，在游離狀態(tài)下不發(fā)出熒光。若檢測到熒光量達(dá)到某個臨界值，則代表陽性，說明樣本中含有病毒的RNA樣本中含有病毒的RNA。若檢測出現(xiàn)“假陰性”現(xiàn)象，原因可能是病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解。
（3）某病毒的E蛋白和P蛋白會引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。構(gòu)建重組活病毒載體疫苗時，獲取某病毒的E基因和P基因E基因和P基因插入腺病毒的基因組中。通過重組腺病毒感染動物可使其獲得免疫力，原因是重組腺病毒在動物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞重組腺病毒在動物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】RNA酶；反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸；2種引物；樣本中含有病毒的RNA；病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解；E基因和P基因；重組腺病毒在動物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.7
相似題
-
1．科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會讓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
2．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~