自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如圖1。回答下列問題：
（1）步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥赖脑蚴?在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長；步驟②需充分振蕩的主要目的是 使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中。
（2）下表為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的 AshbyAshby培養(yǎng)基，原因是 該培養(yǎng)基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源，LB培養(yǎng)基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有選擇作用該培養(yǎng)基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源，LB培養(yǎng)基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有選擇作用。
| 培養(yǎng)基類型 | 培養(yǎng)基組分 |
| Ashby培養(yǎng)基 | 甘露醇（C6H14O6）、KH2PO4、MgSO4?7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂 |
| LB培養(yǎng)基 | 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸餾水、瓊脂 |
涂布器
涂布器
，若在④的平板上統(tǒng)計的菌落的平均數(shù)量為126個，則每克土壤中含有的固氮菌為 1.26×107
1.26×107
個。（4）將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)48小時，經(jīng)離心后收集下層細胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進行固氮能力的測定，篩選出固氮能力最強的菌種CM12，為進一步鑒定其固氮能力，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進行3組盆栽實驗，30天后測定土壤微生物有機氮含量，結(jié)果如圖2。
注：CK：對照處理組；N：尿素處理組（每盆土壤中50mI.有氮全營養(yǎng)液：成分為在1000mL.無氮植物營養(yǎng)液中加入0.12g尿素）；CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50 mL，接種自身固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液）。
①對照組（CK）的處理為
每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液
每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液
。②實驗結(jié)果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約
83.3
83.3
%（保留1位小數(shù)）。③自生固氨菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是
自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制
自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制
。【答案】在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長；使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中；Ashby；該培養(yǎng)基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源，LB培養(yǎng)基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有選擇作用；涂布器；1.26×107；每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液；83.3；自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：3難度：0.7
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1．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，需經(jīng)細菌的分解才能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細菌的有關(guān)問題，請分析回答：
（1）上圖是利用法進行微生物接種，把聚集的菌種分散逐步到培養(yǎng)基的表面．除此方法外，常用的微生物接種方法還有（寫一種）．
（2）如果要對培養(yǎng)的菌落進行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對接種環(huán)進行，灼燒的接種環(huán)冷卻后才能接種的原因是．
（3）下面是兩種培養(yǎng)基的配方：表1：A培養(yǎng)基配方
表2：B培養(yǎng)基配方KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4?7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 1 000mL
①配制培養(yǎng)基的操作步驟纖維素粉 NaNO3 Na2HPO4?7H2O KH2PO4 MgSO4?7H2O KCl 酵母浸膏 H2O 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 1 000mL （用字母順序回答）．
a.倒平板 b.計算 c.溶化 d.稱量 e.滅菌
②通常培養(yǎng)基采用法滅菌，在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒置，目的是．
③如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應(yīng)選擇上述（A、B）配方的培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中加入指示劑，可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素．
④據(jù)B培養(yǎng)基的成分，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是．
（4）尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：13引用：2難度：0.5 -
2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某生物興趣小組同學(xué)試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能把尿素高效降解為氨的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟乳下圖所示．請分析回答問題．
（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4?7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 瓊脂 15g 將上述物質(zhì)溶解后，
用自來水定容到1 000mL，理由是．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和．
（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）下列材料或用具中：
①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管
③實驗操作者的雙手
需要滅菌的是：；需要消毒的是：．（填序號）
（6）實驗結(jié)果后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行處理后，才能倒掉．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：11引用：1難度：0.5 -
3．致病菌與抗生素。
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的傳染病。 結(jié)核分枝桿菌的細胞壁厚脂質(zhì)含量高，能抵御不利自然環(huán)境，在干痰中可存活 6-8 個月，若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結(jié)核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官，但以肺部感染最多。
（1）結(jié)核病的傳播途徑主要是。
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
（2）根據(jù)病原菌在體內(nèi)的感染部位，推測結(jié)核分枝桿菌的代謝方式是。
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對結(jié)核分枝桿菌的抑菌效果，研究者從患者體內(nèi)提取的病原菌進行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時提供生長因子的是。
將分離得到的結(jié)核分枝桿菌進行增殖培養(yǎng)后，取細菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上，然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng) 4 周，實驗結(jié)果如圖1．其中圓紙片 A、B 分別浸過抗生素 A 和抗生素 B，圓紙片 C 浸過抗生素 A、B 的混合物。圖2是細菌結(jié)構(gòu)示意圖，圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
（4）欲得到如圖1實驗結(jié)果，接種過程用到的實驗器材有（多選）。
（5）實驗中圓紙片 D 用作實驗對照，對圓紙片D的處理方法是。根據(jù)實驗結(jié)果，說明圓紙片周圍清晰區(qū)大小與抗生素抑菌效果的關(guān)系：，并從抗生素對細菌產(chǎn)生的作用解釋圓紙片C周圍清晰區(qū)大于圓紙片A和B的原因。發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：33引用：1難度：0.6
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