基因定點突變是指按照特定的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換、重排等變異。如圖甲是一種PCR介導的基因定點突變示意圖。圖乙是研究人員利用基因M1構建基因表達載體的過程。
（1）圖甲所示的基因定點突變技術需要多次PCR，并對PCR的中間產物A、B進行純化，據圖分析，得到中間產物A、B需要的引物對分別是 引物1和引物3、引物2和引物4引物1和引物3、引物2和引物4，至少要進行 22輪循環(huán)。研究人員利用圖中相關酶對基因M和產物A、B進行充分酶切后得到不同的片段，長度（kb）如下表，則圖中基因敲除片段的長度為 0.23kb0.23kb，基因M1的長度為 6.09kb6.09kb。
| 基因M | A | B | |
| 長度 | 3.24、2.8、0.15、0.13 | 2.8、0.09 | 3.24、0.05 |
真核細胞和細菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活
真核細胞和細菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活
。鑒定PCR產物通常用 瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
方法。（3）研究人員將基因M1與Ti質粒重構前需要在基因M1的C、D兩端分別加上的黏性末端序列為
-TCGA、ACGT-
-TCGA、ACGT-
。構建重組質粒過程所需要的酶有 HindⅢ、PstI、DNA連接酶
HindⅢ、PstI、DNA連接酶
。（4）重組質粒能夠完成轉化作用的原理是
Ti質粒上的T-DNA能夠轉移并整合到受體細胞的染色體上
Ti質粒上的T-DNA能夠轉移并整合到受體細胞的染色體上
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物1和引物3、引物2和引物4；2；0.23kb；6.09kb；真核細胞和細菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活；瓊脂糖凝膠電泳；-TCGA、ACGT-；HindⅢ、PstI、DNA連接酶；Ti質粒上的T-DNA能夠轉移并整合到受體細胞的染色體上
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：53引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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