菊花是兩性花，LFY是控制花分生組織形成的基因，LFY 基因過量表達(dá)會(huì)使植物開花提前。為使菊花花期提前，科研人員利用過表達(dá)的擬南芥LFY基因制備轉(zhuǎn)基因菊花，重組Ti質(zhì)粒的部分信息及實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。啟動(dòng)子均為真核生物啟動(dòng)子?；卮鹣铝袉栴}：
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重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選LFY轉(zhuǎn)基因菊花。
（1）本實(shí)驗(yàn)中潮霉素的作用是篩選

轉(zhuǎn)入LFY基因的菊花細(xì)胞

轉(zhuǎn)入LFY基因的菊花細(xì)胞

。步驟①的培養(yǎng)一般

不需要

不需要

 （填“需要“或“不需要”）光照。圖中Ⅰ中應(yīng)填

愈傷組織

愈傷組織

。
（2）調(diào)整步驟②和步驟③培養(yǎng)基中

生長素和細(xì)胞分裂素

生長素和細(xì)胞分裂素

的濃度和比例可誘導(dǎo)菊花芽或根的形成。
（3）以

菊花染色體DNA

菊花染色體DNA

為模板，選用LFY基因特異性引物，用PCR檢測LFY基因是否導(dǎo)入菊花細(xì)胞中。用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花中LFY蛋白的表達(dá)水平，進(jìn)一步篩選轉(zhuǎn)基因菊花.
（4）為避免該LFY轉(zhuǎn)基因菊花中潮霉素抗性基因帶來潛在的環(huán)境問題，可以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案，利用攜帶雙T-DNA的Ti質(zhì)粒（圖2）制備轉(zhuǎn)基因菊花。已知當(dāng)Ti質(zhì)粒存在雙T-DNA時(shí)，兩個(gè)T-DNA可以獨(dú)立整合進(jìn)植物細(xì)胞染色體DNA中。設(shè)計(jì)一個(gè)轉(zhuǎn)基因植物制備和雜交育種相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)方法，篩選只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花

將LFY基因和潮霉素抗性基因分別克隆到Ti質(zhì)粒的兩個(gè)T-DNA上，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒；利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選同時(shí)表達(dá)LFY基因和潮霉素抗性基因的菊花；將轉(zhuǎn)基因菊花自交，在子代中篩選出只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花

將LFY基因和潮霉素抗性基因分別克隆到Ti質(zhì)粒的兩個(gè)T-DNA上，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒；利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選同時(shí)表達(dá)LFY基因和潮霉素抗性基因的菊花；將轉(zhuǎn)基因菊花自交，在子代中篩選出只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花

。（ 簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路即可）