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核移植是克隆動(dòng)物的重要手段,核供體細(xì)胞的分化狀態(tài)會(huì)影響體細(xì)胞核移植胚胎的發(fā)育效率,研究者利用克隆豬對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了研究。
(1)克隆豬的培育過程如圖1,重構(gòu)細(xì)胞經(jīng)
有絲
有絲
分裂(卵裂期)發(fā)育至囊胚,可移植到丙豬子宮中??寺∝i的誕生說明體細(xì)胞的細(xì)胞核具有
全能性
全能性
,圖1克隆豬的表型不完全與甲豬一致,原因是
克隆豬的線粒體基因來自乙豬,表型也要受環(huán)境的影響
克隆豬的線粒體基因來自乙豬,表型也要受環(huán)境的影響
。

(2)豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞,豬胎兒成纖維細(xì)胞則是高度分化的體細(xì)胞。研究者比較了兩細(xì)胞內(nèi)RNA m6修飾(即RNA某位點(diǎn)的甲基化,可提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性)水平,以及細(xì)胞作為核供體時(shí)重構(gòu)胚的發(fā)育效率,結(jié)果如表。
核供體細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 胎兒成纖維細(xì)胞
供體細(xì)胞內(nèi)RNAm6修飾水平 1.0 0.7
重構(gòu)胚的發(fā)育效率 發(fā)育至卵裂期的重構(gòu)胚占比 71.2% 55.3%
發(fā)育至囊胚期的重構(gòu)胚占比 26.3% 15.9%
結(jié)果表明核供體細(xì)胞的分化程度越高,
RNA m6A修飾水平和重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低
RNA m6A修飾水平和重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低
。
(3)M基因編碼的甲基轉(zhuǎn)移酶催化RNA的m6A修飾。比較骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和胎兒成纖維細(xì)胞的M基因上游序列的甲基化水平,結(jié)果如圖2。
基因上游序列存在
RNA聚合
RNA聚合
酶的結(jié)合位點(diǎn),該酶可催化基因的轉(zhuǎn)錄。據(jù)圖2可知成纖維細(xì)胞M基因上游序列的甲基化程度
高于
高于
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證M基因上游序列的甲基化程度是導(dǎo)致不同供體細(xì)胞RNA m6A修飾水平差異的原因。思路如下:
實(shí)驗(yàn)組用DNA甲基化抑制劑處理骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,對(duì)照組不處理;檢測(cè)兩組的M基因上游序列甲基化水平。
請(qǐng)修正實(shí)驗(yàn)方案:
應(yīng)選擇豬胎兒成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料,還應(yīng)檢測(cè)RNAm6A修飾水平
應(yīng)選擇豬胎兒成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料,還應(yīng)檢測(cè)RNAm6A修飾水平

(4)進(jìn)一步研究表明,RNA m6A修飾水平高的供體細(xì)胞核移植胚胎中DNA損傷位點(diǎn)較少。綜合上述研究,推測(cè)豬胎兒成纖維細(xì)胞核移植胚胎發(fā)育能力較低的原因,梳理成如圖3。

【答案】有絲;全能性;克隆豬的線粒體基因來自乙豬,表型也要受環(huán)境的影響;RNA m6A修飾水平和重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低;RNA聚合;高于;應(yīng)選擇豬胎兒成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料,還應(yīng)檢測(cè)RNAm6A修飾水平
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/21 8:0:9組卷:3引用:1難度:0.6
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