利用酵母菌分解廢紙是一種環(huán)保的方式，但廢紙中的纖維素分子量大不能直接進(jìn)入酵母菌，且酵母菌無(wú)法分解利用環(huán)境中的纖維素。為解決這一難題，科學(xué)家將纖維素酶基因通過(guò)重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌。其所用質(zhì)粒及其酶切位點(diǎn)如圖1，外源DNA上的纖維素酶基因及其酶切位點(diǎn)如圖2．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）圖1、圖2中的質(zhì)粒和纖維素酶基因分別作為重組DNA技術(shù)中的運(yùn)載體和目的基因運(yùn)載體和目的基因，為使兩者能夠有效組合，圖中可選用的最合適的限制酶是HindIII和Pst IHindIII和Pst I。
（2）若質(zhì)粒被HindⅢ限制酶識(shí)別的序列是-AAGCTT-，并在A與A之間切割。請(qǐng)畫出被切割后所形成的黏性末端。
（3）科學(xué)家進(jìn)一步構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒，進(jìn)行了一系列的研究。圖3是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)輸?shù)氖疽鈭D。
①圖3中已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的菌株有菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
②設(shè)置菌株Ⅰ作為對(duì)照，是為了驗(yàn)證質(zhì)粒和酵母菌質(zhì)粒和酵母菌均不攜帶纖維素酶基因。
③將4株菌株分別置于以纖維素為唯一碳源唯一碳源的培養(yǎng)基上，其中菌株Ⅰ和菌株Ⅱ菌株Ⅰ和菌株Ⅱ兩個(gè)菌株不能存活。
④據(jù)圖推測(cè)A基因片段的作用是使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合；微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．
【答案】運(yùn)載體和目的基因；HindIII和Pst I；菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；質(zhì)粒和酵母菌；唯一碳源；菌株Ⅰ和菌株Ⅱ；使纖維素酶可以固定于細(xì)胞壁表面
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：23引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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