我國傳統(tǒng)白酒釀造過程中糖化與發(fā)酵往往同時(shí)進(jìn)行，隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)使酒糟酸度不斷降低，普通α-淀粉酶的活性也隨之降低，導(dǎo)致淀粉水解不徹底。獲得耐酸性α-淀粉酶成為生產(chǎn)的迫切需求，某科研團(tuán)隊(duì)欲對(duì)α-淀粉酶進(jìn)行改造或獲得高產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的酵母菌。回答下列問題：

（1）使用酵母菌作為菌種進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)，酸度不斷降低的原因是

酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸都生成CO₂

酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸都生成CO₂

。
（2）某研究人員從芽孢桿菌中獲得耐酸性α-淀粉酶基因通過基因工程技術(shù)獲得產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的酵母菌，其流程如圖1所示：
①為讓目的基因插入質(zhì)粒，質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有

一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)

一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)

?；蚬こ痰暮诵牟襟E是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

（填圖中字母）。
②過程c中欲檢測耐酸性α-淀粉酶基因是否插入酵母菌的DNA上，可采用DNA分子雜交技術(shù)，即將轉(zhuǎn)基因酵母菌的基因組DNA提取出來，以

耐酸性α-淀粉酶基因

耐酸性α-淀粉酶基因

作為探針，使探針與基因組DNA雜交。
（3）研究人員通過蛋白質(zhì)工程也獲得了耐酸性α-淀粉酶：
①基本操作流程是從耐酸性α-淀粉酶功能出發(fā)→

DCBE

DCBE

（從下列操作或思路中選擇正確的序號(hào)并排序）。
A．人工合成α-淀粉酶基因
B．人工合成耐酸性α-淀粉酶基因
C．推測耐酸性α-淀粉酶的氨基酸序列
D．設(shè)計(jì)耐酸性α-淀粉酶的三維結(jié)構(gòu)
E．將獲得的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶
F．將獲得的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生產(chǎn)α-淀粉酶
②不同團(tuán)隊(duì)對(duì)α-淀粉酶進(jìn)行了不同改造，實(shí)驗(yàn)后獲得其中兩種耐酸性α-淀粉酶，分別標(biāo)號(hào)1、2；在一定條件下測定酶活性，結(jié)果如圖2所示。研究人員認(rèn)為

1號(hào)酶

1號(hào)酶

更適宜工廠化生產(chǎn)，理由是

1號(hào)酶的活性受pH影響小

1號(hào)酶的活性受pH影響小

。
（4）根據(jù)以上信息，總結(jié)基因工程與蛋白質(zhì)工程的區(qū)別與聯(lián)系：

區(qū)別：基因工程只能生產(chǎn)自然界中現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或蛋白質(zhì)工程可以創(chuàng)造全新蛋白質(zhì)。
聯(lián)系：基因工程是蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)，蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

區(qū)別：基因工程只能生產(chǎn)自然界中現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或蛋白質(zhì)工程可以創(chuàng)造全新蛋白質(zhì)。
聯(lián)系：基因工程是蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)，蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

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