當(dāng)前位置:
試題詳情
PCR作用可分為3步反應(yīng):
(1)雙鏈DNA分開(kāi):將雙鏈DNA雙鏈DNA加熱至95℃左右時(shí)使DNA變性DNA變性,也叫做解鏈,這一溫度下使DNA雙鏈打開(kāi)DNA雙鏈打開(kāi)。
(2)與引物結(jié)合:在變性變性之后,將溫度迅速降至5050℃.這一降溫過(guò)程也叫退火,則引物可與退火后的兩條單鏈DNA兩條單鏈DNA分別結(jié)合。
(3)DNA新鏈延伸:將溫度上升至72℃,Taq酶(熱穩(wěn)定的DNA聚合熱穩(wěn)定的DNA聚合酶)可利用4種游離脫氧核苷酸為原料4種游離脫氧核苷酸為原料組裝模板的互補(bǔ)鏈,從引物延伸值3’末端。
以上3步反應(yīng)需要重復(fù)15~30個(gè)循環(huán),每一循環(huán)形成兩個(gè)雙鏈DNA,在20個(gè)循環(huán)后,1個(gè)DNA片段可擴(kuò)增上百萬(wàn)個(gè)拷貝,30個(gè)循環(huán)后可產(chǎn)生10億個(gè)拷貝。
【考點(diǎn)】目的基因的篩選與獲取.
【答案】雙鏈DNA;DNA變性;DNA雙鏈打開(kāi);變性;50;兩條單鏈DNA;熱穩(wěn)定的DNA聚合;4種游離脫氧核苷酸為原料
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/27 14:0:0組卷:117引用:1難度:0.7
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1.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)通過(guò)PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長(zhǎng)度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等,還需加入的原料是( )
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:27引用:1難度:0.6 -
2.通過(guò)設(shè)計(jì)引物,運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過(guò)程,其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對(duì),但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì),反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:115引用:5難度:0.7 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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