植物被野生型農(nóng)桿菌感染后會產(chǎn)生瘤狀結(jié)構(gòu)，主要原因是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒中含有生長素合成基因（A）、細胞分裂素合成基因（B）。黃萎病是危害棉花種植的常見疾病，科學家通過基因工程技術(shù)將抗黃萎病基因?qū)朊藁?，獲得抗黃萎病棉花。如圖為農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)段結(jié)構(gòu)示意圖。據(jù)圖回答問題：
（1）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，需要用兩種不同的限制酶切割目的基因和Ti質(zhì)粒，目的是 防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，防止反向連接防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，防止反向連接。通過農(nóng)桿菌的侵染將重組DNA分子轉(zhuǎn)入棉花細胞中，影響轉(zhuǎn)化效率的因素除了溫度、培養(yǎng)時間等環(huán)境因素外還有 農(nóng)桿菌的種類、農(nóng)桿菌的數(shù)量、棉花細胞的生理狀態(tài)、棉花細胞的對農(nóng)桿菌的敏感性等農(nóng)桿菌的種類、農(nóng)桿菌的數(shù)量、棉花細胞的生理狀態(tài)、棉花細胞的對農(nóng)桿菌的敏感性等。（答出2點即可）
（2）為防止農(nóng)桿菌侵染植物細胞后使植物產(chǎn)生瘤狀結(jié)構(gòu)，必須把T-DNA片段上的基因 A、BA、B（用字母表示）敲除或替換掉。
（3）成功得到導入目的基因的棉花后可用植物組織培養(yǎng)快速繁殖，植物組織培養(yǎng)的方式之一是胚性細胞經(jīng)過卵裂、分化、器官發(fā)生器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚。從分子水平上檢測目的基因轉(zhuǎn)錄是否成功的方法是 核酸分子雜交技術(shù)檢測是否轉(zhuǎn)錄出特定RNA核酸分子雜交技術(shù)檢測是否轉(zhuǎn)錄出特定RNA。
（4）棉花植株在多次繼代培養(yǎng)后可能會喪失細胞全能性的表達能力，可能是由于細胞或組織中的 激素平衡激素平衡被打破，或細胞對 外源生長物質(zhì)外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，防止反向連接；農(nóng)桿菌的種類、農(nóng)桿菌的數(shù)量、棉花細胞的生理狀態(tài)、棉花細胞的對農(nóng)桿菌的敏感性等；A、B；器官發(fā)生；核酸分子雜交技術(shù)檢測是否轉(zhuǎn)錄出特定RNA；激素平衡；外源生長物質(zhì)
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：16引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7