很多城市開始對(duì)生活垃圾實(shí)施分類管理，其中廚余垃圾通過微生物處理后，可實(shí)現(xiàn)無公害化和資源化。脂肽是某些微生物發(fā)酵過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，由脂肪酸和肽鏈連接而成。研究人員通過構(gòu)建解脂耶氏酵母和解淀粉芽孢桿菌共培養(yǎng)系統(tǒng)，研究將廚余垃圾轉(zhuǎn)化為脂肪酸和脂肽等增值產(chǎn)品。思路如下（圖1）：
回答下列問題：
（1）在生態(tài)系統(tǒng)組成成分中，解脂耶氏酵母菌和解淀粉芽孢桿菌都屬于

分解者

分解者

。廚余垃圾的發(fā)酵培養(yǎng)基都能為二者的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即

水、碳源、氮源和無機(jī)鹽

水、碳源、氮源和無機(jī)鹽

。
（2）廚余垃圾中油脂成分復(fù)雜，在最佳降解條件下利用解脂耶氏酵母菌處理色拉油和餐飲油，菌體生物量和油脂物質(zhì)濃度隨時(shí)間的變化如圖2所示：
圖2表明，解脂耶氏酵母菌適合用于廚余垃圾中油脂物質(zhì)的降解，依據(jù)是

油脂物質(zhì)濃度顯著降低且菌體生物量顯著增多

油脂物質(zhì)濃度顯著降低且菌體生物量顯著增多

。
（3）脂肪酸是脂肽合成的前體物質(zhì)，研究人員欲篩選獲得脂肪酸合成和外排能力強(qiáng)的解脂耶氏酵母菌，利用基因工程技術(shù)分別將解脂耶氏酵母菌株上敲除不同種類基因，獲得的菌株在發(fā)酵液中培養(yǎng)60小時(shí)后，提取并檢測(cè)脂肪酸產(chǎn)量。最終得到Y(jié)L21菌株，敲除基因過程利用了重疊延伸PCR技術(shù)，技術(shù)流程如圖3所示：
圖3流程中，多個(gè)階段需要添加不同引物，完成下表（注：選用該引物在對(duì)應(yīng)的空格中劃“+”，不選用則劃“-”）。

③----；④+--+

③----；④+--+

	引物A1	引物A2	引物B1	引物B2
①	+	+	-	-
②	-	-	+	+
③
④

擴(kuò)增的A片段和B片段能拼接成一個(gè)融合片段，引物A2和B1的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵，二者引物長(zhǎng)度為40個(gè)核苷酸，A2引物的5'端前20個(gè)堿基應(yīng)與

D

D

（填選項(xiàng)）互補(bǔ)，后20個(gè)堿基應(yīng)與

A

A

（填選項(xiàng)）互補(bǔ)。
A．A片段的模板鏈 B．B片段的模板鏈 C．引物A1 D．引物B1
（4）菌株選育后，研究人員進(jìn)一步優(yōu)化了兩種菌株的接種時(shí)間和接種比例，先接種解脂耶氏酵母菌（YL21），在培養(yǎng)第8小時(shí)接種解淀粉芽孢桿菌，接種比例為1：1的條件下，脂肽產(chǎn)量最高。除此以外，影響發(fā)酵過程和脂肽產(chǎn)量因素還有

加料間隔時(shí)間（或“是否補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)組分”）、溫度、pH、溶解氧

加料間隔時(shí)間（或“是否補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)組分”）、溫度、pH、溶解氧

（寫出兩點(diǎn)即可）