為提高青霉素的生產(chǎn)效率，我國某科研團隊構建了一株重組產(chǎn)黃青霉基因工程菌并申請專利。重組產(chǎn)黃青霉基因工程菌的構建方法步驟如下：①制備原始產(chǎn)黃青霉菌的原生質(zhì)體；②提取原始產(chǎn)黃青霉菌的基因組DNA；③構建基因敲除片段；④將步驟③構建的基因敲除片段導入步驟①制備的產(chǎn)黃青霉的原生質(zhì)體中，得到重組產(chǎn)黃青霉基因工程菌。請回答下列相關問題：
（1）制備原生質(zhì)體需去除原始產(chǎn)黃青霉菌的 細胞壁細胞壁。
（2）鑒定DNA是否被提取出，可使用 二苯胺二苯胺試劑，鑒定原理是 在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色。
（3）構建基因敲除片段時使用了重疊延伸PCR技術，該技術的常用過程如下：
該過程共需設計 44種引物，引物的作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸。
（4）已知基因?qū)朐|(zhì)體的方法與導入大腸桿菌的方法相似，則步驟④常用方法為 Ca2+處理法Ca2+處理法，培養(yǎng)獲得的重組產(chǎn)黃青霉基因工程菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至 酸性酸性（填“酸性”、“中性”或“堿性”）。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】細胞壁；二苯胺；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色；4；使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸；Ca2+處理法；酸性
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/11/27 1:0:1組卷：9引用：2難度：0.5
相似題
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1．科研人員克隆了豬白細胞抗原基因（SLA-2基因），構建了該基因的真核表達載體，進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復制原點的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請在答題紙相應位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓。實驗結果如圖2，根據(jù)實驗結果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
2．以下是有關分離與鑒別DNA的技術，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
3．下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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