將PV病毒外殼蛋白基因(PVY-CP)導入馬鈴薯,并使之表達即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯。圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作,PVY-CP可以從質(zhì)粒A中獲??;質(zhì)粒B是選用的運載體,另已知部分限制酶識別序列和切割位點:
BamHⅠ | HindⅢ | BglⅡ | SmaⅠ |
G↓GATCC CCTAG↑G |
A↓AGCTT TTCGA↑A |
A↓GATCT TCTAG↑A |
CCC↓GGG GGG↑CCC |
請結(jié)合圖像,運用所學知識回答問題:
(1)含有PVY-CP的質(zhì)粒A保存在某細菌群體中,各個細菌含有相關不同的基因,這樣的細菌群體稱為
基因文庫(部分基因文庫、基因組文庫)
基因文庫(部分基因文庫、基因組文庫)
。(2)PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達式
不能
不能
(能、不能)正確反映DNA聚合酶的功能,這是因為DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的引物鏈(DNA單鏈)上
DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的引物鏈(DNA單鏈)上
。(3)關于步驟②中使用Klenow酶的猜測,合理的有
降低化學反應的活化能、可以將DNA片段的黏性末端變成平末端、能催化DNA鏈的合成
降低化學反應的活化能、可以將DNA片段的黏性末端變成平末端、能催化DNA鏈的合成
。(4)步驟④中應該使用的限制酶是
BglⅡ、SmaⅠ
BglⅡ、SmaⅠ
。構(gòu)建表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在、遺傳,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用
使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在、遺傳,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用
。(5)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進行轉(zhuǎn)化,首先需要將質(zhì)粒C導入
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
中,進而轉(zhuǎn)化馬鈴薯,一般情況下,不能直接用未處理的農(nóng)桿菌菌作為受體細胞,原因是未處理的農(nóng)桿菌吸收外源DNA的能力極弱
未處理的農(nóng)桿菌吸收外源DNA的能力極弱
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】基因文庫(部分基因文庫、基因組文庫);不能;DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的引物鏈(DNA單鏈)上;降低化學反應的活化能、可以將DNA片段的黏性末端變成平末端、能催化DNA鏈的合成;BglⅡ、SmaⅠ;使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在、遺傳,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用;農(nóng)桿菌;未處理的農(nóng)桿菌吸收外源DNA的能力極弱
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:12引用:1難度:0.7
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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