營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子后才能生長(zhǎng)的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的常規(guī)步驟為：誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型→鑒定缺陷型。
（1）用紫外線誘變大腸桿菌，誘變后常采用含青霉素的培養(yǎng)基淘汰野生型大腸桿菌，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型大腸桿菌得以富集。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 中性或微堿中性或微堿性，再在壓力和溫度分別為 100kPa,121℃100kPa,121℃的條件下進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，富集培養(yǎng)時(shí)一般使用液體培養(yǎng)基并在搖床上進(jìn)行，搖床的作用是 增加培養(yǎng)液的溶解氧，使菌種和培養(yǎng)液充分混合增加培養(yǎng)液的溶解氧，使菌種和培養(yǎng)液充分混合。
（2）夾層平板培養(yǎng)法可用于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的檢出，其原理如圖1所示，先在培養(yǎng)皿上倒一薄層基本培養(yǎng)基，凝固后再接種一層誘變處理的菌液，其上再澆一層基本培養(yǎng)基，凝固后放入 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)出菌落，再倒一層完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。若結(jié)果如圖2所示，其中菌落 BB（填“A”或“B”）即為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。
（3）研究小組一利用生長(zhǎng)圖譜法初步確定檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養(yǎng)基乙的A～E這5個(gè)區(qū)域中分別添加不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，然后用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法將檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在圖3培養(yǎng)基上，若培養(yǎng)一段時(shí)間后在圖3的BC交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是 氨基酸和維生素氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌。
（4）研究小組二用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個(gè)小組，用5個(gè)濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時(shí)間。
| 組別 | 維生素組合 | ||||
| 1 | 維生素A | 維生素B1 | 維生素B2 | 維生素B6 | 維生素B12 |
| 2 | 維生素C | 維生素B1 | 維生素D2 | 維生素E | 煙酰胺 |
| 3 | 葉酸 | 維生素B2 | 維生素D2 | 膽堿 | 泛酸鈣 |
| 4 | 對(duì)氨基苯甲酸 | 維生素B6 | 維生素E | 膽堿 | 肌醇 |
| 5 | 生物素 | 維生素12 | 煙酰胺 | 泛酸鈣 | 肌醇 |
維生素B1
維生素B1
；若菌株為葉酸和生物素的雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在圖4培養(yǎng)基上形成菌落的位置是 3與5的交界處
3與5的交界處
。【答案】中性或微堿；100kPa，121℃；增加培養(yǎng)液的溶解氧，使菌種和培養(yǎng)液充分混合；恒溫培養(yǎng)箱；B；稀釋涂布平板；氨基酸和維生素；維生素B1；3與5的交界處
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/11/23 17:30:2組卷：20引用：1難度：0.7 -
2．自生固氮菌能夠利用大氣中的N2，并將其還原為氨。某課題小組從土壤中分離自生固氮菌，并制成菌肥施人土壤中以增加土壤肥力。請(qǐng)回答相關(guān)問題：
（1）自生固氮菌能將氮?dú)膺€原成氨，利用氮元素可合成體內(nèi)的（物質(zhì)，舉出兩種）。
（2）在分離土壤自生固氮菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般應(yīng)含有的營(yíng)養(yǎng)成分有，在這種選擇性培養(yǎng)基中其他微生物不能生長(zhǎng)的原因是。
（3）接種固氮菌時(shí)可采用平板劃線法，在做第二次及其后的劃線時(shí)，應(yīng)從開始劃線。且每次劃線前，都要對(duì)接種環(huán)作何處理？。
（4）經(jīng)平板劃線培養(yǎng)可形成自生固氮菌的菌落，菌落是指。在選擇培養(yǎng)時(shí)，能夠“濃縮”所需自生固氮菌的原因是。發(fā)布：2024/10/27 17:0:2組卷：16引用：1難度：0.7 -
3．人們希望能借助纖維素酶將地球上最豐富、最廉價(jià)的可再生資源纖維素轉(zhuǎn)化為能直接利用的能源和資源．纖維素酶可以從能分解纖維素的細(xì)菌培養(yǎng)液中提取．某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下分離土壤中纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→
→鑒別培養(yǎng)．
（1）請(qǐng)補(bǔ)充題干“”中的實(shí)驗(yàn)流程：；找不到合適的取樣環(huán)境，可采取的辦法是．
（2）選擇培養(yǎng)的目的是；研究人員用纖維素、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，其中加入的纖維素為微生物的生長(zhǎng)提供．
（3）為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以培養(yǎng)基上加入剛果紅染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用法接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)生的菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)．
（4）擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需要對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)．取0.2mL樣品，用固體培養(yǎng)基對(duì)其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板，菌落數(shù)分別是180、200、160．則樣品中微生物的數(shù)量為個(gè)/mL．該統(tǒng)計(jì)結(jié)果（低于、高于）實(shí)際值．發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：3難度：0.5
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