《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成,具有調和肝脾,緩急止痛的作用,芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸??蒲袌F隊通過制備抗芍藥苷的單克隆抗體,將其純化后結合在固相載體上,讓芍藥甘草湯流過,去除湯中芍藥苷,用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關性?;卮鹣铝袉栴}。
(1)制備單克隆抗體時,將芍藥苷與蛋白質結合作為抗原,定期間隔免疫小鼠,目的是 獲得大量分泌芍藥苷抗體的B淋巴細胞(獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞)獲得大量分泌芍藥苷抗體的B淋巴細胞(獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞)取免疫后的小鼠脾臟,剪碎并用 胰蛋白(或膠原蛋白)胰蛋白(或膠原蛋白)酶處理得到小鼠脾臟細胞,圖中誘導其與骨髓瘤細胞融合的試劑X是 聚乙二醇聚乙二醇,經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細胞Y具有 既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體特點。
(2)用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞Y并收集上清液,利用 抗原抗體雜交抗原抗體雜交技術對上清液進行抗體陽性檢測。選擇陽性孔中的細胞繼續(xù)植入小鼠腹腔內進行體內培養(yǎng),可從 小鼠腹水小鼠腹水中提取到抗芍藥苷的單克隆抗體。
(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機分為對照組、造模組進行如下處理,造模組前期已完成冰醋酸致痛處理(冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激,此時小鼠會出現(xiàn)扭體反應)。請完善實驗方案。
組別 | 前期處理 | 后期處理 |
對照組 | 腹腔注射生理鹽水 | I |
造模組 | 腹腔注射冰醋酸 | 模型組:口服生理鹽水 |
陽性藥組:口服芍藥甘草湯 | ||
實驗組:Ⅱ |
①表中I、Ⅱ分別進行的處理是
a
a
、c
c
(用上述字母表示)。②結果與分析:
若前期處理后,造模組小鼠扭體次數(shù)顯著
高于
高于
對照組,表明致痛處理成功。后期處理結束后測定各組小鼠扭體次數(shù),若結果為 實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組
實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組
,則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】獲得大量分泌芍藥苷抗體的B淋巴細胞(獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞);胰蛋白(或膠原蛋白);聚乙二醇;既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體;抗原抗體雜交;小鼠腹水;a;c;高于;實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:3引用:2難度:0.6
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