科研團(tuán)隊(duì)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)等培育了營養(yǎng)器官富含淀粉的新型煙草，可專用于燃料乙醇的生產(chǎn)。回答下列問題。
（1）首先提取煙草總RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成cDNA，以cDNA為模板 PCRPCR進(jìn)行擴(kuò)增，克隆出控制淀粉生物合成的ADP葡萄糖焦磷酸化酶小亞基基因NtSSU。
（2）目的基因NtSSU.和載體pCAMBIAI303上均有識別序列不同的限制酶為KpnⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)。構(gòu)建基因表達(dá)載體的簡要過程是 使用兩種限制酶處理目的基因 NtSSU和載體 pCAMBIA1303，隨后使用DNA連接酶將載體和目的基因連接起來使用兩種限制酶處理目的基因 NtSSU和載體 pCAMBIA1303，隨后使用DNA連接酶將載體和目的基因連接起來。
（3）用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌，可使重組DNA更容易轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌。然后將得到的轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌與煙草葉片共同培養(yǎng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生 愈傷組織愈傷組織進(jìn)一步分化形成胚狀體，培養(yǎng)再生成植株。
（4）目的基因NtSSU整合到受體細(xì)胞基因組上，最終能否翻譯出目的蛋白質(zhì)至關(guān)重要，因此需要進(jìn)行蛋白質(zhì)的檢測，從受體細(xì)胞中提取 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)后，進(jìn)行電泳分離，然后利用相應(yīng)的 抗體抗體進(jìn)行檢測。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；使用兩種限制酶處理目的基因 NtSSU和載體 pCAMBIA1303，隨后使用DNA連接酶將載體和目的基因連接起來；Ca2+；愈傷組織；蛋白質(zhì)；抗體
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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