科研工作者將TaNHX2基因轉(zhuǎn)移到某植物細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽植株新品種。如圖是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列分別是↓GATC，G↓AATTC，G↓GATCC，質(zhì)粒上各有一個(gè)Sau3AI和EcoRI的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)分析并回答下列問題：
（1）若用BamHI切割圖中所示的DNA片段獲得了目的基因，則選用限制酶Sau3AISau3AI切割質(zhì)粒，以便構(gòu)建重組質(zhì)粒，該方案的缺陷是會(huì)出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定。故切割圖中所示的DNA片段的最佳方案是選用限制酶EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI。
（2）實(shí)驗(yàn)中酶作用的強(qiáng)弱可用酶活性來表示，通常，酶活性的高低可用單位時(shí)間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量單位時(shí)間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量來表示。
（3）若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因（TaNHX2基因）導(dǎo)入原生質(zhì)體，請(qǐng)寫出主要操作流程：先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞。
原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，其作用是維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)。
（4）為了從個(gè)體水平檢測(cè)成果，需要進(jìn)行的操作是轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Sau3AI；目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定；EcoRI和BamHI；單位時(shí)間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量；先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞；維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)；轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：30引用：3難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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