科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療,其技術流程如圖。請回答相關問題:
(1)圖1中用到了 動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、基因工程、胚胎干細胞動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、基因工程、胚胎干細胞等現(xiàn)代生物技術(寫三項即可)。
(2)由圖1可知,步驟②中要分離出ES細胞,需將重組胚胎培養(yǎng)到 囊胚囊胚期。將目的基因導入ES細胞而不是上皮細胞,是因為ES細胞在功能上具有 發(fā)育的全能性發(fā)育的全能性。
(3)步驟③中,先需要利用PCR技術擴增干擾素基因??梢愿鶕?jù) 一段已知的干擾素基因的核苷酸序列一段已知的干擾素基因的核苷酸序列合成引物,圖2A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應選取 B和CB和C作為引物(DNA復制方向總是從5′向3′延伸)。對干擾素基因片段和質粒進行酶切時,可選用限制酶的組合為 HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
(4)將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察,選擇發(fā) 綠綠色熒光的細胞進行體外誘導。為檢測干擾素基因是否表達,可用的檢測物質是 干擾素的抗體干擾素的抗體(填“標記的干擾素基因”或“干擾素的抗體”)。
【考點】干細胞的培養(yǎng)及其應用.
【答案】動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、基因工程、胚胎干細胞;囊胚;發(fā)育的全能性;一段已知的干擾素基因的核苷酸序列;B和C;HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ;綠;干擾素的抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:4引用:1難度:0.7