EPO是促紅細胞生成素的英文簡稱,是一種激素樣物質(zhì),可促進體內(nèi)新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因,并采用中國倉鼠卵巢(CHO)細胞表達系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物,其過程如圖。請回答下列問題:
(1)從人體組織中提取EPO的mRNA,在 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成EPO基因的cDNA,再通過PCR技術(shù)獲得大量EPO基因,PCR的產(chǎn)物一般通過 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。進行擴增時需先加熱至90?95℃,后冷卻至55?60℃,以上調(diào)控溫度操作的目的分別是 使DNA雙鏈打開解為單鏈使DNA雙鏈打開解為單鏈、使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。
(2)供體母鼠通常情況下每次排卵8?12枚,為使其超數(shù)排卵,需注射 促性腺促性腺 激素以排出更多的卵子,培養(yǎng)到 MⅡ中MⅡ中 期與獲能的精子相遇,精子穿越透明帶,完成體外受精。
(3)①過程構(gòu)建了基因表達載體,內(nèi)部包括不可缺少的組成部分,其中 啟動子啟動子 能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。切割含EPO基因的DNA與載體時通常用兩種不同限制酶的原因是 防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接。
(4)采用 顯微注射顯微注射 技術(shù),將重組表達載體導入小鼠受精卵中,將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。當胚胎發(fā)育至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚 時期,向受體移植。
(5)若想檢驗轉(zhuǎn)基因倉鼠是否成功表達EPO,可以采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交 技術(shù)對血液來進行檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合;體外受精和胚胎移植.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;瓊脂糖凝膠電泳;使DNA雙鏈打開解為單鏈;使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合;促性腺;MⅡ中;啟動子;防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接;顯微注射;桑葚胚或囊胚;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/8 8:0:9組卷:94引用:1難度:0.6
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(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
(4)⑤過程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點,如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( )
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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