用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人類(lèi)需要的生物產(chǎn)品。在此過(guò)程中需要使用多種工具酶,其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)如圖所示。
回答下列問(wèn)題:
(1)常用的DNA鏈接酶有E.coli DNA連接酶和T4DNA連接酶。如圖中 EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA連接酶連接。如圖中 EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤEcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。
(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征,如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn),可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能 自我復(fù)制、穩(wěn)定存在自我復(fù)制、穩(wěn)定存在;質(zhì)粒DNA分子上有 一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)便于外源DNA插入;質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)。利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞,方法是 用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞。
(4)表達(dá)載體含有啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是指 轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的地方,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的地方,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】EcoRⅠ、PstⅠ;EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ;磷酸二酯鍵;自我復(fù)制、穩(wěn)定存在;一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn);用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞;轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的地方,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:605引用:7難度:0.6
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(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程
(4)⑤過(guò)程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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