人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從人血漿中制備。圖一是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA的兩條途徑，其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，以及HAS基因兩側(cè)的核苷酸序列。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）依據(jù)圖一和圖二分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)下列敘述錯(cuò)誤的是

C

C

。
A．應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因
B．應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒
C．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個(gè)酶A的識(shí)別位點(diǎn)
D．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C完全處理將得到2種大小的DNA片段
（2）在利用PCR技術(shù)獲取目的基因的過(guò)程中，以從生物材料中提取的DNA作為模板，利用

引物

引物

尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。從復(fù)制過(guò)程看，PCR擴(kuò)增與體內(nèi)DNA復(fù)制產(chǎn)物發(fā)生變異的可能性更大的原因是

PCR擴(kuò)增DNA是完全解旋后進(jìn)行復(fù)制（體內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制）

PCR擴(kuò)增DNA是完全解旋后進(jìn)行復(fù)制（體內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制）

。
（3）圖一過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與

農(nóng)桿菌

農(nóng)桿菌

混合后共同培養(yǎng)，旨在讓

T-DNA

T-DNA

整合到植物細(xì)胞染色體DNA上；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含

無(wú)色物質(zhì)K

無(wú)色物質(zhì)K

的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
（4）圖一③過(guò)程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是

顯微注射技術(shù)

顯微注射技術(shù)

。
（5）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)表達(dá)載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是應(yīng)

目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子

目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子

（答出兩點(diǎn)即可）。