1985年史密斯建立了噬菌體展示技術,科學家利用這項技術,按照基因工程的原理,將控制抗體某片段合成的DNA序列插入噬菌體DNA的特定部位,使培養(yǎng)所得的噬菌體表面帶有抗體片段,這些噬菌體既可以特異性識別抗原,又能感染宿主菌進行擴增。請回答下列問題。
(1)實施這項技術,首先需從外周血、脾或淋巴結等部位分離出 BB(填“B”“T”或“體”)細胞,提取得到總mRNA后,可通過 逆轉錄逆轉錄獲得對應的DNA。
(2)噬菌體DNA的某啟動子和終止子之間有限制酶A和B的酶切位點,在利用 PCRPCR擴增相應DNA序列時,需對兩個引物的序列稍加修改,使擴增產物具有限制酶 A和BA和B(A、B、A和B)的酶切位點,從而有助于擴增所得的DNA序列與噬菌體DNA的定向連接。
(3)培養(yǎng)得到噬菌體后,可以利用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交方法對其進行篩選,以獲得表面帶有特定抗體片段的噬菌體。
(4)對帶有特定抗體片段的噬菌體進行克隆化培養(yǎng)時,不需要不需要(填“需要”或“不需要”)利用CaCl2處理細菌,理由是 噬菌體可以直接侵染細菌噬菌體可以直接侵染細菌。
【考點】噬菌體侵染細菌實驗.
【答案】B;逆轉錄;PCR;A和B;抗原—抗體雜交;不需要;噬菌體可以直接侵染細菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:6引用:2難度:0.7
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