擬南芥的耐寒性與AtCOR15a基因受低溫誘導(dǎo)后表達(dá)的AtCOR15a蛋白相關(guān)。研究人員將該基因作為目的基因培育抗凍的番茄新品種。圖1、圖2分別為構(gòu)建的能夠表達(dá)AtCOR15a的表達(dá)載體及培育流程示意圖，請回答下列問題：
（1）要想短時間內(nèi)獲得大量的AtCOR15a基因所采用的技術(shù)為 PCRPCR，該技術(shù)構(gòu)建的反應(yīng)體系中應(yīng)加入 AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液?？赏ㄟ^PCR技術(shù)在所有DNA分子中專一性擴(kuò)增出AtCOR15a基因，其原因是 引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計合成的引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計合成的。
（2）位于AtCOR15a基因上游的RD29A是誘導(dǎo)型啟動子，根據(jù)題干信息推測其在轉(zhuǎn)基因植物中的作用是 使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄，表達(dá)載體中nptⅡ基因賦予受體細(xì)胞抗卡那霉素的能力，其作用是 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來。
（3）表達(dá)載體構(gòu)建時，AtCOR15a基因和nptⅡ基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部，是因?yàn)?Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中。
（4）圖2中擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基類型為 液體液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基，③④過程的培養(yǎng)條件是不同的，請列舉兩點(diǎn) 兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液；引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計合成的；使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄；鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來；Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中；液體；兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：19引用：1難度：0.7
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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