葉綠體是植物基因工程的理想受體，將外源基因整合到葉綠體DNA中往往能夠獲得高效表達(dá)，由此發(fā)展出葉綠體基因工程?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）葉綠體基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體，表達(dá)載體中除目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)、

標(biāo)記基因

標(biāo)記基因

等。 啟動(dòng)子的作用是

可以被DNA聚合酶識(shí)別，并開(kāi)始轉(zhuǎn)錄 cDNA不含內(nèi)含子

可以被DNA聚合酶識(shí)別，并開(kāi)始轉(zhuǎn)錄 cDNA不含內(nèi)含子

。葉綠體DNA上的基因在結(jié)構(gòu)和表達(dá)方式等方面有原核細(xì)胞基因的特性，若目的基因來(lái)源于真核生物，則往往選用目的蛋白對(duì)應(yīng)的cDNA片段而不是基因組DNA片段作為目的基因，原因是

cDNA不含內(nèi)含子

cDNA不含內(nèi)含子

。
（2）將目的基因?qū)霟煵菁?xì)胞葉綠體時(shí)，要穿過(guò)多層生物膜，因而常將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體轟擊進(jìn)入葉綠體，提高轉(zhuǎn)化效率，該方法稱為

基因槍法

基因槍法

。
（3）檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的葉綠體時(shí)，實(shí)驗(yàn)組以待測(cè)的樣本DNA為模板，使用目的基因的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，同時(shí)將以目的基因片段為模板的組別作為陽(yáng)性對(duì)照組，將以

不含目的基因片段

不含目的基因片段

為模板的組別作為陰性對(duì)照組。若

擴(kuò)增出了目的基因片段基因

擴(kuò)增出了目的基因片段基因

，則說(shuō)明目的基因?qū)氤晒Α?br />（4）轉(zhuǎn)入葉綠體中的基因

不會(huì)

不會(huì)

 （填“會(huì)”或“不會(huì)”）隨花粉傳遞給子代，理由是

其為細(xì)胞質(zhì)遺傳，所以花粉的目的基因不會(huì)傳遞給子代

其為細(xì)胞質(zhì)遺傳，所以花粉的目的基因不會(huì)傳遞給子代

。