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人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過程。圖中Tet表示四環(huán)素抗性基因,Amp表示氨芐青霉素抗性基因,四種限制酶的識別序列及切割位點如表所示?;卮鹣铝袉栴}:

限制酶 BamHⅠ HaeⅢ BclⅠ NotⅠ
識別序列
及切割位點
GGATCC
CCTAGG
GGCC
CCGG
TGATCA
ACTAGT
GCGGCCGC
CGCCGGCG
(1)一般從cDNA文庫中獲取人乳鐵蛋白基因,該文庫的建立方法是
人體發(fā)育某個時期的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA片段,與載體連接后導(dǎo)入受體菌群體儲存
人體發(fā)育某個時期的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA片段,與載體連接后導(dǎo)入受體菌群體儲存
。
(2)為構(gòu)建重組載體,應(yīng)選擇
BamHⅠ和BclⅠ
BamHⅠ和BclⅠ
酶對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割。將上述酶切后得到DNA末端連接起來,連接部位的6個堿基對序列為
。
(3)以大腸桿菌為受體細(xì)胞,將酶切后的連接產(chǎn)物導(dǎo)入受體細(xì)胞。為篩選出導(dǎo)入目的基因的受體菌,首先需要將得到的上述大腸桿菌接種到含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
培養(yǎng)基(A)上,一段時間后,將A上生長的菌落拓印到含
四環(huán)素
四環(huán)素
培養(yǎng)基(B)上,在B上能生長的
不是
不是
(填“是”或“不是”)成功導(dǎo)入重組質(zhì)的受體菌。經(jīng)檢測,部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因不能表達(dá),其最可能的原因是
用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同,部分目的基因與質(zhì)粒反向連接
用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同,部分目的基因與質(zhì)粒反向連接
。

【答案】人體發(fā)育某個時期的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA片段,與載體連接后導(dǎo)入受體菌群體儲存;BamHⅠ和BclⅠ;;氨芐青霉素;四環(huán)素;不是;用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同,部分目的基因與質(zhì)粒反向連接
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:3引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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