P17蛋白是非洲豬瘟病毒(ASFV)主要的編碼蛋白,由P17基因編碼,鑒于此,科研人員利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)重組ASFVP17蛋白并制備單克隆抗體,具體的操作流程為P17重組蛋白的真核表達(dá)及鑒定→小鼠免疫P17蛋白→檢測P17抗體→細(xì)胞融合及篩選→單克隆抗體腹水的制備,回答下列有關(guān)問題:
(1)若P17基因序列已知,則可以通過 PCR擴(kuò)增、DNA合成儀人工合成PCR擴(kuò)增、DNA合成儀人工合成(答出2種)的方法獲取,要檢測P17基因在受體細(xì)胞中是否成功表達(dá),在分子水平可用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術(shù)鑒定。
(2)上述操作流程中“檢測P17抗體”的目的是 獲得產(chǎn)生特異性抗體的雜交細(xì)胞獲得產(chǎn)生特異性抗體的雜交細(xì)胞,“細(xì)胞融合及篩選”中想獲得 B細(xì)胞B細(xì)胞和 骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞,常用 滅活的病毒、聚乙二醇滅活的病毒、聚乙二醇(至少答出2種)的方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合,最終篩選出的細(xì)胞是 既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體,單克隆抗體除從腹水中獲取外,還可通過 體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)方法獲得。
(3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備(答出2點(diǎn))。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】PCR擴(kuò)增、DNA合成儀人工合成;抗原-抗體雜交;獲得產(chǎn)生特異性抗體的雜交細(xì)胞;B細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞;滅活的病毒、聚乙二醇;既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體;體外培養(yǎng);特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:1難度:0.7
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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