酶的改造
利用天然DszC酶可獲得低硫石油,減少酸雨,但從紅球菌獲得的天然DszC酶的活性會(huì)受到產(chǎn)物的抑制,為此研究者對(duì)DSzC酶進(jìn)行改造,步驟如下:
步驟Ⅰ.將3種DszC突變基因用SpeⅠ和EcoRⅠ酶切后,分別與質(zhì)粒(圖1)連接。
步驟Ⅱ.將連接后的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞,放入含有抗生素的培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。
步驟Ⅲ.培養(yǎng)受體細(xì)胞,并檢測(cè)酶活和產(chǎn)物濃度的關(guān)系(圖2)。
(1)在階段Ⅱ,培養(yǎng)基上發(fā)出綠色熒光的受體細(xì)胞中,一定含有的基因是 ③④③④(用下列編號(hào)答題);階段Ⅱ篩選得到的受體細(xì)胞中,含有的基因是 ②④②④(用下列編號(hào)答題)。
①天然DszC基因
②突變DszC基因
③綠色熒光基因
④抗性基因
(2)階段Ⅰ-Ⅲ,突變DSzC基因得到表達(dá)的階段是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ(Ⅲ/Ⅱ/Ⅰ)。
(3)已知天然DSzC基因有1254個(gè)堿基對(duì),結(jié)合圖2信息,從不同酶的活性和受產(chǎn)物抑制的程度,分析突變DSzC γ酶基因的長(zhǎng)度是1257個(gè)堿基對(duì)還是303個(gè)堿基對(duì)?請(qǐng)寫(xiě)出分析過(guò)程。 是303個(gè)堿基對(duì)。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說(shuō)明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說(shuō)明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對(duì)應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異是303個(gè)堿基對(duì)。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說(shuō)明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說(shuō)明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對(duì)應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】③④;②④;Ⅱ、Ⅲ;是303個(gè)堿基對(duì)。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說(shuō)明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說(shuō)明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對(duì)應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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