已知擬南芥植物多次培養(yǎng)后依然具有全能性，常用擬南芥進(jìn)行多方面的研究和應(yīng)用，原生質(zhì)體培養(yǎng)就是常用的技術(shù)之一，
（1）原生質(zhì)體的制備：選取生長(zhǎng)到3-4周的擬南芥葉片，先用70%的酒精消毒后，用

無(wú)菌水

無(wú)菌水

沖洗5次，將葉片切成0.5-1mm的小片放置于盛有

（0.5-0.6mol/L的）甘露醇

（0.5-0.6mol/L的）甘露醇

的培養(yǎng)皿中，另取一培養(yǎng)皿，加入

過(guò)濾

過(guò)濾

滅菌后的酶液，將葉片放入酶液，振蕩酶解3小時(shí)，酶解后過(guò)濾出大組織塊，濾液中是酶和原生質(zhì)體混合物，將濾液可以通過(guò)

離心

離心

方法進(jìn)行分離。影響原生質(zhì)體純度的因素有

細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況、酶的作用時(shí)間、酶的濃度、離心時(shí)間、離心強(qiáng)度等

細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況、酶的作用時(shí)間、酶的濃度、離心時(shí)間、離心強(qiáng)度等

（寫(xiě)2種）
（2）篩選出具有活性的原生質(zhì)體，可將處理后的目的基因通過(guò)

顯微注射

顯微注射

法導(dǎo)入到受體細(xì)胞，原生質(zhì)體只有再生出

細(xì)胞壁

細(xì)胞壁

后才能進(jìn)行細(xì)胞增殖，擬南芥的全能性的表達(dá)程度主要取決于該植物的

基因型

基因型

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