研究表明,HER2/neu是一種原癌基因,它表達(dá)的X蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)??筙蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)X蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長,目前已成為有效的生物治療手段。如圖1是制備分泌抗X抗體的過程示意圖,據(jù)圖回答問題:
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(1)為了獲得能產(chǎn)生抗X蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞,應(yīng)給小鼠注射 X蛋白X蛋白。
(2)選擇X蛋白作為單克隆抗體的作用靶點,是因為X蛋白在成年個體的正常組織中 低表達(dá)低表達(dá)(填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”)。X蛋白是一個跨膜蛋白,結(jié)構(gòu)如圖2所示。制備免疫小鼠用的X蛋白(抗原)時,應(yīng)構(gòu)建 胞外胞外區(qū)基因,轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。
(3)誘導(dǎo)已免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原理是 細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性,常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEGPEG。
(4)在動物細(xì)胞融合過程中,需要將所選取的組織細(xì)胞離散開,以利于細(xì)胞融合,可用 胰蛋白酶胰蛋白酶處理離體組織細(xì)胞使之分散開。
(5)步驟④將融合細(xì)胞在特定的 選擇選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),目的是篩選出 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞。
(6)步驟⑤將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),吸取有克隆生長的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的 上清液上清液(填“上清液”或“沉淀細(xì)胞”),采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽性檢測。
(7)將多次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)過 體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),獲取大量的單克隆抗體。
(8)治療乳腺癌時,可單獨使用抗X蛋白單克隆抗體,也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合,殺死癌細(xì)胞。單克隆抗體的優(yōu)點是 特異性強、靈敏度高、能大量制備特異性強、靈敏度高、能大量制備。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】X蛋白;低表達(dá);胞外;細(xì)胞膜的流動性;PEG;胰蛋白酶;選擇;雜交瘤細(xì)胞;上清液;抗原-抗體雜交;體外培養(yǎng);特異性強、靈敏度高、能大量制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:39引用:2難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />
A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的T淋巴細(xì)胞 B.經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞 C.實驗組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱 D.對照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實驗組可驗證上述推測 發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( )
A.單克隆抗體制備過程中需要使用Taq酶 B.ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的運輸方式為協(xié)助擴散 C.溶酶體破裂導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞死亡 D.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力 發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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