L-肉堿具有參與脂肪氧化、抗疲勞、延遲患阿爾茨海默綜合征等功能。據(jù)報道大腸桿菌能將巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成L-肉堿,但效率較低??蒲腥藛T通過基因工程將BCD基因、F基因以及T基因?qū)氲酱竽c桿菌細胞內(nèi)以提高L-肉堿的轉(zhuǎn)化率。實驗過程及結(jié)果如圖所示,分析并回答下列問題:
(1)實驗過程中用PCR技術獲得目的基因,PCR反應體系需要加入的有機物有DNA模板、dNTP、耐高溫DNA聚合酶和引物引物。實驗過程中不能將BCD基因、F基因以及T基因直接導入到大腸桿菌細胞內(nèi),而是構(gòu)建重組質(zhì)粒后再導入大腸桿菌,原因是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能夠表達使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能夠表達,并能遺傳給下一代。圖中兩個重組質(zhì)粒目的基因的首端都含有啟動子T7,T7是RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。
(2)將重組所粒1和重組質(zhì)粒2導入大腸桿菌時,應用Ca2+Ca2+處理大腸桿菌,使細胞處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。
(3)為了篩選出同時含有BCD基因、F基因以及T基因的大腸桿菌,實驗的思路是在同時含有卡那霉素和氯霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌在同時含有卡那霉素和氯霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌。
(4)研究發(fā)現(xiàn)巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成L-肉堿是一個可逆反應過程,得到的工程菌在含有巴豆甜菜堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)2小時后,L-肉堿的含量基本穩(wěn)定,此時可以及時移除產(chǎn)物(更換培養(yǎng)液),使反應向生成L-肉堿的方向進行及時移除產(chǎn)物(更換培養(yǎng)液),使反應向生成L-肉堿的方向進行,以提高產(chǎn)量。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物;使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能夠表達;RNA聚合酶;Ca2+;易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子;在同時含有卡那霉素和氯霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌;及時移除產(chǎn)物(更換培養(yǎng)液),使反應向生成L-肉堿的方向進行
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:11引用:3難度:0.6
相似題
-
1.下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7