GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用，研究人員構(gòu)建了GDNF基因的表達載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細胞中，用于細胞基因治療的研究，請回答：
（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是使細胞分散開使細胞分散開；
（2）構(gòu)建含GCDNF基因的表達載體時，需選擇圖1中的XhoⅠXhoⅠ限制酶進行酶切．
（3）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種：單個載體自連、CDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）為鑒定這3種連接方式，選擇HpaⅠ酶和BamⅡ酶對篩選得到的載體進行雙酶切，并對酶切后的DNA片透進行電泳分析，結(jié)果如圖2所示，圖中第②②泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的．
（4）將正向連接的表達載體導(dǎo)入神經(jīng)干細胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達，可用相應(yīng)的抗體抗體與提取的蛋白質(zhì)雜交，當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定密度時，需進行傳代傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于細胞干細胞移植治療實驗．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使細胞分散開；XhoⅠ；②；抗體；傳代
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：264引用：10難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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