CAR—T細(xì)胞療法是通過設(shè)計CAR基因,并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中,使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞,CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后,激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化,從而實現(xiàn)對癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶,主要過程如下圖。
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(1)要獲取CAR基因,可采取PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增,前提是 CAR基因序列已知CAR基因序列已知。
(2)連接形成pCDH—CAR上除了目的基因外,還有一些必須的部分,比如啟動子和終止子,其中啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別結(jié)合位點。
(3)完成過程②常用方法是 顯微注射顯微注射法。此外,還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,將CAR基因整合到T細(xì)胞的 染色體DNA染色體DNA上。
(4)檢測CAR-T細(xì)胞中的CAR基因是否表達(dá)了所采用的方法是 抗原-抗體雜交技術(shù)抗原-抗體雜交技術(shù)。
(5)在將CAR-T細(xì)胞輸給病人進(jìn)行治療之前,還需在實驗室內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。體外培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外,一般還需添加 動物血清動物血清等天然成分。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】CAR基因序列已知;RNA聚合酶;顯微注射;染色體DNA;抗原-抗體雜交技術(shù);動物血清
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/21 8:0:10組卷:1引用:1難度:0.6
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