表觀遺傳調(diào)節(jié)異常是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素之一，N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物mRNA上最常見的一種修飾。研究發(fā)現(xiàn)，胃癌細胞中存在m6A去甲基化酶（ALKBH5）過表達和STC2（癌癥相關(guān)基因）mRNA的m6A修飾水平降低的異常現(xiàn)象?？蒲腥藛T利用基因工程技術(shù)實現(xiàn)ALKBH5基因沉默和STC2基因的過表達，以研究ALKBH5介導的m6A甲基化修飾對胃癌細胞遷移的影響。
（1）已知STC2基因的α鏈為轉(zhuǎn)錄的模板鏈，據(jù)圖1分析，利用PCR擴增目的基因時，需要在引物 CC的5'端添加BamHⅠ識別序列和強啟動子序列，在引物 BB的5'端添加SacⅠ識別序列。
（2）為確保目的基因正確插入質(zhì)粒，需要選擇 BamHⅠ、SacⅠBamHⅠ、SacⅠ限制酶切割質(zhì)粒。將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌體時，可利用潮霉素和卡那霉素篩選出導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，試簡要表述篩選思路：依次使用含卡那霉素的培養(yǎng)基和含潮霉素的培養(yǎng)基篩選，能夠在含卡那霉素培養(yǎng)基中生長，而不能在含潮霉素培養(yǎng)基中生長的大腸桿菌即為導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。
（3）研究人員分別用不同方式處理胃癌細胞，并測得胃癌細胞遷移標志蛋白含量如圖3。根據(jù)結(jié)果推測ALKBH5基因影響胃癌遷移的機理是 ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】C；B；BamHⅠ、SacⅠ；依次使用含卡那霉素的培養(yǎng)基和含潮霉素的培養(yǎng)基篩選，能夠在含卡那霉素培養(yǎng)基中生長，而不能在含潮霉素培養(yǎng)基中生長的大腸桿菌即為導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌；ALKBH5基因過表達導致ST2基因表達的mRNA去甲基化，進而導致STC2基因過表達而引起癌細胞遷移
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/9 8:0:9組卷：28引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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