鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國際性難題。我國科學(xué)家從小麥近緣屬植物長穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發(fā)現(xiàn)，用光誘導(dǎo)型啟動子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達(dá)，其結(jié)合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達(dá)。
（1）PrbcS是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)

轉(zhuǎn)錄

轉(zhuǎn)錄

過程。
（2）通過PCR技術(shù)擴(kuò)增Fhb7基因片段，反應(yīng)過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是

防止DNA變性

防止DNA變性

和

保持Taq酶活性所需溫度條件

保持Taq酶活性所需溫度條件

。
（3）圖中甲、乙均為Fhb7基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中的中間載體，請分析重組載體丙的部分構(gòu)建過程。區(qū)別含有中間載體甲與含有重組載體丙的微生物的方法是

用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)

用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)

。經(jīng)酶切后凝膠電泳，測得含2B基因片段長度為0.3kb,經(jīng)圖示信息分析，含光誘導(dǎo)型啟動子-T基因的片段長度約為

1.8kb

1.8kb

。據(jù)圖分析，形成重組載體丙，需要使用限制酶

HindШ和NotⅠ

HindШ和NotⅠ

切割中間載體甲和乙，圖中重組載體丙問號處有

6

6

種限制酶的酶切位點。

（注：圖中單詞代表限制酶酶切位點）